Travaux Pratiques de Biotechnologie (Ch2TPBioTech)

Objectifs :

L'exploitation du monde microbien au laboratoire implique de savoir :

1. Maîtriser la multiplication de bactéries en culture.

2. Extraire, étudier et manipuler l'ADN, base de l'information génétique.

3. Isoler et analyser les protéines cellulaires, agent de transformations enzymatiques de substrats biologiques.    

Compétences :

connaissances scientifiques et rigueur
Compétence technique (précision, rigueur, fiabilité)
Capacité de compréhension face à un problème
Capacité d'élaboration d'une réponse à un problème
Capacité de déduction à partir de faits observés
Expression écrite; rédaction d'un rapport
Travail en équipe
Organisation du travail
Apprentissage d'un outil spécifique

Prérequis :

  

Contenu du cours :

Microbiologie et Génétique microbienne

1. Techniques de stérilisation et application de ces techniques à la préparation de matériel et de milieux de cultures stériles.  

2. Techniques d'ensemencement des milieux liquides et solides.  Conservation des souches bactériennes.  

3. Numération de germes vivants : techniques d'inclusion.  

4. Mesure de la croissance bactérienne : établissement de la courbe de croissance par mesure de la densité optique.  Manipulation correcte de micro volumes.  

5. Caractérisation microscopique des bactéries.

6. Génétique microbienne : conjugaison, transfection et transformation.

Génie génétique

1. Extraction d'ADN, hydrolyse enzymatique, électrophorèse.  

2. Quantification d'ADN.  

3. Clonage : ligation, transformation bactérienne et sélection des recombinants.  

4. Purification et marquage de sondes moléculaires.  

5. Hybridation : criblage de banque génomique et Southern blot.  

6. Amplification par PCR.  

7. Séquençage de l'ADN.

Purification de protéines

1. Extraction, purification et concentration d'une enzyme.  

2. Dosage protéique et enzymatique.

Méthodes Immunologique

1. Dosage quantitatif immuno-enzymatique.  

2. Western blot et immunorévélation    

Méthode d'enseignement :

Travaux pratiques de laboratoire    

Lectures recommandées :

Méthode d'évaluation :

Evaluation Continue

Examen