Travaux Pratiques de Chimie Analytique et Médicale (BM2TPChAn)

Objectifs :

- élaborer et mettre en oeuvre une procédure d'analyse à partir d'un mode opératoire.

- utiliser et comprendre les différentes techniques de dosage et les appareils de mesures,

- traiter les résultats à l'aide de l'outil informatique et les valider avec un esprit critique.

Compétences :

connaissances scientifiques et rigueur
Compétence technique (précision, rigueur, fiabilité)
Capacité de compréhension face à un problème
Capacité d'élaboration d'une réponse à un problème
Capacité de déduction à partir de faits observés
Maîtrise transversale de la discipline
Organisation du travail
Apprentissage d'un outil spécifique
Capacité d'abstraction

Prérequis :

Cours de Chimie générale, organique et de statistiques de 1ère année.

Contenu du cours :

1. Mesures de spectrophotométrie

- d'émission

a) atomique : dosage de Na+ et K+ dans le sérum.

b) moléculaire : initiation à la fluorimétrie ; dosage par fluorescence de l'acide acétylsalicylique d'un analgésique.

- d'absorption

a) atomique : dosage du Mg2+, du Fe3+.

b. moléculaire : initiation à la spectrométrie d'absorption ; dosage du phosphore inorganique, du cholestérol, du fer sérique et de la TIBC, du glucose.

2. Analyse qualitative et quantitative des  protéines - Activité enzymatique.

Séparation des protéines sériques par électrophorèse sur agarose.

Séparation de protéines  par électrophorèse en gel d'acrylamide (SDS-PAGE).

Dosage des protéines sériques par les méthodes de Bradfort, méthode au biuret et de Lowry.

Dosage des protéines urinaires par turbidimétrie.

Enzymologie : étude cinétique et recherche de l'activité de la phosphatase alcaline; étude cinétique et activité de la LDH.

3. Applications statistiques aux dosages.

Dosage du magnésium par absorption atomique: analyse de variance à deux dimensions, spécificité (comparaison de moyennes), précision, corrélation.

Dosage des protéines par Bradfort : analyse de variance, droite inverse, établissement des limites de quantification et de détection, précision d'un résultat.

4. Chromatographie

Analyse qualitative et quantitative des alcools par G.C.

Analyse qualitative et quantitative des composants d'un analgésique par HPLC.

Purification de la lactate déshydrogénase de coeur de porc par chromatographie par gel-filtration (séphadex G25) et chromatographie d'échange d'ions.

5.Dosages immunologiques

Dosage d'une hormone par radio Immuno Assay (estradiol).

Dosage, par ELISA, de l'albumine bovine sérique biotinylée, Immunodétection de la transferrine humaine après électrophorèse en gel d'acrylamide et transfert de membrane de nitrocellulose.

Méthode d'enseignement :

Exercices dirigés et travaux pratiques

Lectures recommandées :

Méthode d'évaluation :

Evaluation continue